Desarrollo de herramientas moleculares para el análisis de muestras de adn altamente degradado

Resumen

La tesis titulada Desarrollo de herramientas moleculares para el análisis de muestras de ADN altamente degradadas, trata de colaborar en la solución del problema que supone la degradación, la fragmentación y la escasez de ADN (ácido desoxirribonucleico) en las muestras que habitualmente se encuentran disponibles en los laboratorios de Genética Forense. Concretamente, la tesis recoge el desarrollo, validación y aplicación en muestras de ADN altamente degradadas, de herramientas basadas principalmente en mini- y midiSTRs (Short Tandem Repeats), caracterizadas por aportar la misma información en cuanto al perfil genético que los STRs ampliamente utilizados, pero con un requerimiento menor de longitud de la cadena de ADN. En total se han desarrollado dos reacciones cuya combinación sobre una misma muestra aumenta el poder de discriminación respecto al uso de una única reacción. Dichas reacciones suponen una mejora en el análisis de muestras de ADN altamente degradadas por lo que han sido objeto de dos solicitudes de patente incluidas en este trabajo de tesis. Así mismo, el desarrollo de miniSTRs requiere el estudio de los polimorfismos de las regiones flanqueantes de STRs, para lo cual en este trabajo se han desarrollado metodologías basadas en DHPLC (Denaturing High Performance Liquid Chromatography) que han permitido detectar diferentes polimorfismos, así como realizar estudios poblacionales de los mismos. Para ello y para la realización de estudios de concordancia entre las STR multiplexes convencionales y las reacciones desarrolladas en el presente trabajo, se han analizado más de mil muestras de los principales grupos poblacionales que residen en la CAPV, como son caucasoides, hispanos y negroides. Por último se presenta una metodología basada en el genotipado por STRs para garantizar la autentificación de las muestras biológicas contenidas en Biobancos. En total, el presente trabajo de tesis contiene 5 trabajos de investigación y dos solicitudes de patente. Actualmente producto de los resultados obtenidos en esta tesis se están redactando nuevos trabajos de investigación.