Regulación genética, farmacológica y fisiopatológica de receptores cannabinoides, mecanismos apoptóticos y neuroplásticos y vías de señalización asociadas involucradas en la adicción a cocaína

Abstract

La presente tesis doctoral está fundamentada en los efectos farmacológicos como fisiopatológicos de la exposición de drogas de abuso, cannabinoides y cocaína, en corteza prefrontal (área de Brodmann 9) de adictos y cerebro de rata y ratón. En un primer trabajo se estudió la posible interacción del sistema cannabinoide sobre las vías apoptóticas extrínseca e intrínseca centrándose, a raíz de estudios previos, en el nuevo sistema de señalización neuronal no-apoptótico mediado por la proteína adaptadora FADD (Fas-associated death domain), por sus formas fosforiladas (p-Ser191 FADD) y otras proteínas de la maquinaria apoptótica que se postula están involucradas en fenómenos de plasticidad sináptica. Manteniendo las vías apoptóticas como tema central de estudio, se llevó a cabo un segundo trabajo en el que se escogió una pequeña pero muy bien caracterizada cohorte de adictos a cocaína (n=10), de los que se seleccionó la corteza prefrontal (área de Brodmann 9) por su directa implicación con los procesos adictivos. Además, para poder comparar se llevó en paralelo el estudio de las mismas proteínas diana en cerebro de ratas tratadas crónicamente con cocaína. Los resultados en cerebro post mortem humano mostraron un incremento en la fragmentación de PARP-1 (polimerasa encargada de la reparación del ADN), sin embargo, un descenso en la expresión de proteínas pro-apoptóticas como Fas, FADD y citocromo c, podrían indicar posibles adaptaciones contrarregulatorias inducidas por el psicoestimulante. Y finalmente, en un tercer trabajo se estudió la modulación del sistema cannabinoide y vías asociadas en adictos bajo el efecto crónico de cocaína. Los resultados mostraban un descenso significativo del receptor cannabinoide tipo I (CB1) en aquellos adictos crónicos puros a cocaína, que no se mostraba en adictos ¿mixtos¿ cocaína/opioides ni en adictos puros a opioides. Esta reducción de la proteína fue avalado por estudios llevados en paralelo en ratones y ratas tratados con cocaína de manera crónica. También se comprobó el estado del receptor D2, proteínas asociadas a la regulación de receptores transmembrana (GRK2, GRK3, GRK5 y GRK6) y una vía de señalización asociada al receptor CB1, la vía de mTOR y su diana p70S6K. El análisis cuantitativo de proteínas de interés se llevó a cabo mediante la técnica de Western blot.