Receptores muscarínicos y transducción de señales a través de la fosfolipasa c beta en corteza cerebral humana postmortem durante el desarrollo y envejecimiento no patológico

Resumen

Esta tesis doctoral realiza un completo estudio de la funcionalidad así como de los niveles de expresión de los principales componentes del sistema de transducción de señales asociado a fosfoinosítidos de membrana (receptores muscarínicos-proteínas Gq/11-fosfolipasa C) en corteza cerebral humana postmortem a lo largo del desarrollo ontogénico (pre- y postnatal) y el envejecimiento "no patológico". En el estudio se han empleado diversas técnicas experimentales: ensayos de funcionalidad de la actividad enzimática fosfolipasa C con [3H]- PtdIns(4,5)P2, técnicas de inmunodetección con anticuerpos específicos y ensayos de fijación con radioligandos, todas ellas adecuadas y válidas para lograr los objetivos trazados. Como principales y novedosos hallazgos de dicho estudio se encuentran que: el receptor muscarínico M1 se encuentra dimerizado de forma constitutiva mediante la formación de interacciones de tipo covalente en las regiones extracelulares del receptor en membranas de corteza prefrontal humana adulta; determina cuantitativamente los niveles de subunidades alfa de las proteínas Gq/11 en membranas de corteza cerebral humana adulta en aproximadamente 800 ng/mg de proteína total de membrana, estos niveles de expresión implican que dichas proteínas suponen un 0.1% del total de proteínas presentes en membranas, y permiten establecer relaciones estequiométricas entre los componentes receptoriales y tranductores del sistema de transducción de señales analizado con un importante exceso de las proteínas Gq/11; con respecto al estudio del desarrollo ontogénico, se describe una alteración severa de la hidrólisis de fosfoinosítidos estimulada a través de receptores muscarínicos y en los niveles de expresión de los enzimas efectores (las cuatro isoformas de la familia fosfolipasa C- beta) así como de los receptores muscarínicos (especialmente de los subtipos M1, M3 y M5) a lo largo de dicho desarrollo que podr