Papel de la pseudoquinasa Tribbles 3 en cáncer de mamaestudios mecanísticos e implicaciones en el pronóstico del subtipo luminal

Zusammenfassung

El cáncer de mama es el tipo tumoral más frecuente en mujeres. Numerosos estudios sobre los procesos moleculares implicados en el desarrollo tumoral mamario han incrementado el conocimiento de esta patología y han permitido la identificación de biomarcadores pronósticos y el desarrollo de nuevas terapias. Sin embargo, sigue siendo la principal causa de muerte por cáncer en mujeres en la mayoría de los países. Se trata de una patología muy heterogénea que se clasifica atendiendo a distintos marcadores moleculares, siendo el subtipo tumoral más frecuente el cáncer de mama luminal, caracterizado por la expresión del receptor de estrógenos y diversas citoqueratinas características de las células epiteliales luminales que conforman los ductos mamarios. TRIB3 es una pseudoquinasa que pertenece a la familia de las proteínas Tribbles y cuya desregulación se ha visto implicada en el desarrollo de distintas patologías, entre las que destacan los trastornos cardiovasculares y el cáncer. Concretamente en cáncer, se ha propuesto que TRIB3 puede desempeñar una acción pro- o antitumoral según el contexto celular y tipo de tumor y, particularmente en cáncer de mama, la bibliografía existente es escasa y poco concluyente. Por ello, en esta tesis doctoral, estudiamos el papel de TRIB3 en el control del desarrollo y progresión del cáncer de mama, utilizando dos aproximaciones experimentales: por un lado, mediante el análisis los niveles y localización subcelular de TRIB3 en muestras de pacientes con cáncer de mama ER positivo y su relación con las características clínicas de dichas pacientes; y por otro lado, a través del estudio del efecto del silenciamiento y la sobreexpresión de TRIB3 en las propiedades tumorigénicas de líneas celulares de cáncer de mama luminal así como los mecanismos moleculares mediante los cuales TRIB3 regula dichas propiedades. El análisis de los datos derivados de las muestras de pacientes mostró que niveles elevados de TRIB3 se asocian con una mayor supervivencia libre de enfermedad y una menor incidencia de metástasis. Por otro lado, los resultados obtenidos empleando líneas celulares mostraron que el silenciamiento de TRIB3 en líneas de cáncer de mama luminal HER2 positivas aumenta la proliferación y capacidad invasiva de estas células. Este efecto se asoció además a un incremento en los niveles de HER2 y a una mayor activación de la vía PI3K/AKT así como a una mayor actividad de la proteína G monomérica RAC1. Por el contrario, el silenciamiento de TRIB3 en líneas de cáncer de mama luminal HER2 negativo, se asoció a una menor proliferación y capacidad invasiva de estas células, así como a una menor actividad de la vía PI3K/AKT y de RAC1. Específicamente, nuestros resultados muestran que existe una regulación cruzada entre TRIB3 y HER2 de manera que HER2 regula positivamente los niveles de TRIB3 mientras que TRIB3 regula negativamente la estabilidad de HER2. Desde el punto de vista mecanístico, nuestros resultados indican que TRIB3 inhibe la fosforilación de AKT por el complejo MTORC2 in vitro y que TRIB3 puede interaccionar de manera diferente con las isoformas de AKT en células HER2 positivas y HER2 negativas. Adicionalmente, este estudio ha permitido identificar a RAC1 y a STUB1 como dos posibles nuevos interactores de TRIB3 candidatos a mediar sus efectos. Finalmente, estudiamos el efecto del tratamiento con distintos agentes antitumorales y encontramos que las células con niveles reducidos de TRIB3, tanto HER2 positivas como las HER2 negativas, fueron más resistentes al tratamiento con agentes quimioterapéuticos, lo que indicaría que TRIB3 podría sensibilizar las células a la terapia y por tanto tener un papel antitumoral en estas condiciones.