Nuevas estrategias de inmunoterapia para el tratamiento del mieloma múltiple

Resumen

El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia de células B caracterizada por la expansión y acumulación de células plasmáticas (CPs) patológicas en la médula ósea (MO). El MM constituye el 1% de todas las neoplasias y supone el 10% de las hemopatías malignas. En las últimas dos décadas se han logrado importantes avances en el tratamiento del MM, principalmente con la introducción de inhibidores del proteosoma, fármacos inmunomoduladores y anticuerpos monoclonales (mAb). Sin embargo, el MM sigue siendo una enfermedad altamente resistente dada su propensión a la heterogeneidad clonal y su compleja interacción con el microambiente medular. Son necesarias estrategias terapéuticas novedosas capaces de revertir la resistencia a los tratamientos de primera y otras líneas. Nos propusimos investigar los mecanismos de acción de isatuximab (mAb anti-CD38) y EM801 (anticuerpo biespecífico BCMAxCD3) mediante cultivos con los fármacos, utilizando tanto líneas celulares como muestras primarias de MO de pacientes con MM. Isatuximab es un mAb IgG1κ, que reconoce específicamente un epítopo concreto de CD38. Inicialmente, hemos investigado un efecto directo de este mAb, sobre el receptor CD38, concluyendo que isatuximab no tiene efecto directo sobre las líneas de MM con baja o alta expresión de CD38. Además, este mAb no produce una liberación significativa de la molécula de la superficie de las CPs. A continuación hemos evaluado diferentes mecanismos de acción responsables del efecto de isatuximab. La citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo se proclama como mecanismo efector más relevante por el cual elimina las CPs mielomatosas, siendo las células NK la subpoblación más importante para la acción inequívoca del fármaco. Los mecanismos de fagocitosis celular y citotoxicidad dependiente de complemento solo ocurrirían en pacientes con una densidad de CD38 muy elevada en sus CPs, mostrando de esta manera una asociación directa entre los niveles de expresión y los mecanismos desarrollados por el fármaco. Además, isatuximab induce depleción significativa de precursores B, basófilos y células NK. Por último demostramos que isatuximab se une tanto al receptor FcγRIII como a CD38 presente en la superficie de células NK, provocando una activación y posterior depleción de estas células. EM801 es una IgG asimétrica, bivalente para BCMA y monovalente para CD3ε. Con este diseño, se produce una unión preferencial de las CPs con los linfocitos T. Inicialmente, hemos demostrado que la molécula BCMA se expresa de modo selectivo en las CPs, estando ausente en el resto de poblaciones leucocitarias. A continuación, mediante microscopia de fluorescencia y fuerza atómica, hemos verificado que EM801 produce una unión estrecha y selectiva de la CP y el linfocito T. Esta unión provoca una activación de los linfocitos T con expresión de marcadores de activación como son CD69 y CD25. Además, mediante ELISA, hemos observado una secreción significativa de interferón gamma, granzima B y perforina. La eficacia del fármaco se demostró en cultivos de MO de 43 pacientes con MM, obteniendo una lisis significativa en el 79% de los casos. Además, se estudió la toxicidad que podría tener EM801 sobre otras células de la MO, no observando una muerte relevante en células B, T, NK ni neutrófilos. Por último, hemos testado EM801 en un modelo de xenoinjerto subcutáneo en ratones NOG, observando regresión tumoral en 6 de 9 ratones tratados. En el modelo animal de mono cynomolgus, utilizado para evaluar la actividad del fármaco en un ambiente autólogo, se corroboró la lisis significativa de CPs, así como una disminución en los niveles de IgG e IgM. En estos animales, se observó un aumento ligero y transitorio de citoquinas, que regresaba a niveles basales tras 24 horas de la inyección del fármaco, con lo que podemos concluir que EM801 muestra un perfil de toxicidad aceptable y un perfil farmacocinético que permitiría su administración semanal.