Identificación de nuevos factores genéticos asociados a enfermedad de Parkinson

Resumen

Esta tesis incluye tres artículos relacionados con factores genéticos asociados a enfermedad de Parkinson (EP). En el primer artículo describimos dos mutaciones del gen PINK1: una deleción del exón 7 (g.16089_16383del293; c.1252_1488del) y una nueva mutación en un punto de corte y empalme (mutación de splicing) en la región 5¿ del exón 7 (g.16378G>A; c.1488 + 1G>A). El análisis de ARNm leucocitario demostró que ambas mutaciones llevaban a la exclusión del exón 7 en el transcrito maduro. La mutación c.1252_1488del producía este efecto por la propia deleción y la mutación c.1488 + 1G>A lo producía por un mecanismo de ¿exon skipping¿. La mutación de splicing c.1488 + 1G>A genera además un transcrito sin alteración del marco de lectura con una deleción de 33 pares de bases (p.V486_K496del) por la activación de un lugar críptico de splicing en la región 5¿ del exón 7. La EP secundaria a estas mutaciones en PINK1 presenta un fenotipo motor benigno con buena respuesta a levodopa y agonistas dopaminérgicos. En algunos casos, estas mutaciones pueden desencadenar alteraciones psiquiátricas y afectivas. El análisis neuropatológico post-mortem de un portador de ambas mutaciones mostró pérdida neuronal en la pars compacta de la sustancia nigra (SNpc) y presencia de cuerpos de Lewy (CL) y neuritas aberrantes en la SNpc, en la formación reticular y en el núcleo basal de Meynert. Sin embargo, la amígdala cerebral y el locus ceruleus (LC) se encontraban preservados. La indemnidad del LC podría ser responsable de la evolución motora benigna y del desarrollo de síntomas psiquiátricos de estos pacientes. En el segundo artículo realizamos un análisis de segregación de haplotipos en familias con EP familiar de inicio tardío en los que se habían descartado las mutaciones más frecuentes de EP. La secuenciación de LRRK2 en 12 familias que presentaban segregación de haplotipos entre los afectos permitió identificar una mutación con cambio de aminoácido (¿missense¿) en el exón 36 de LRRK2 (c.5281A>C; p.S1761R) en una región altamente conservada del dominio COR. Esta mutación probablemente modifica la interacción del dímero ROC-COR haciéndolo más inestable y altera así la actividad quinasa de LRRK2. La nueva mutación causa una EP típica que responde bien a levodopa con edad de inicio variable. La mutación p.S1761R puede alterar la dimerización de LRRK2 y disminuir la actividad quinasa de la proteína. En este estudio demostramos además, que las mutaciones en LRRK2 o en regiones cercanas podrían explicar hasta un 3,4% de la EP familiar de inicio tardío. El tercer artículo que forma parte de esta tesis es un estudio de asociación de casos y controles en el que se analizaron si las variantes rs9652490 y rs11856808 del gen LINGO1, incrementaban el riesgo de desarrollar EP en población española. Observamos un incremento de la frecuencia del genotipo rs11856808T/T en individuos con EP en comparación con controles (OR = 1,46; P corregida = 0,02). El modelo genético que mejor explicaba esta distribución de los genotipos del rs11856808 en los individuos con EP era recesivo (test de acción génica recesiva: P corregida = 0,01). Los análisis de estratificación mostraron que la frecuencia del genotipo rs11856808T/T era mayor en los subgrupos de enfermos con una EP predominantemente tremorígena y EP con fenotipo clásico que en el grupo con EP rígido-acinética (test de acción génica recesiva para el subgrupo con EP con fenotipo clásico: P corregida = 0,004). Las variantes estudiadas de LINGO1 no parecen un factor de riesgo importante para desarrollar EP en población caucásica general. Sin embargo, el rs11856808 puede aumentar el riesgo de desarrollar EP en población española, sobre todo en EP con fenotipo clásico o tremorígeno.