Evaluación del potencial citotóxico de tensioactivos mediante ensayo del MTT en distintas líneas celulares

Resumen

Uno de los diversos métodos in vitro, que han sido propuestos como alternativa a los ensayos in vivo para determinar el potencial irritativo de nuevos compuestos, es el ensayo del MTT. El fundamento de este ensayo de citotoxicidad es que el MTT o Bromuro de (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)- 2,5-difenil tetrazol), cuando es reducido por las deshidrogenasas mitocondriales se transforma en el correspondiente formazán, que precipita en forma de cristales coloreados. Estos cristales disueltos en dimetilsulfóxido presentan un máximo de absorción a 540 nm. La medida de la absorbancia es por consiguiente directamente proporcional al número de células viables. En este trabajo se ha evaluado mediante este ensayo, el potencial citotóxico de 10 tensioactivos pertenecientes a las cuatro clases posibles: Cloruro de Benzalconio y Bromuro de 1-hexadecilpiridina (catiónicos), Lauril sulfato sódico, ácido deoxicólico y Jordapon (aniónicos), Tritón X100 y TWEEN 20 (no iónicos) y Chaps, Chapso y Mirataine (anfóteros). Se han empleado cuatro líneas celulares de muy distinto origen (MDCK, SIRC, V-79 y HT-29), con objeto de ver si existían diferencias entre ellas y con las células epiteliales de córnea de conejo. Se han realizado tratamientos de 1h, 4h y 20h de duración, con y sin período de recuperación. La correlación con los datos in vivoy el orden relativo de citotoxicidad de los distintos compuestos se ha mantenido en todas las líneas celu lares y con todos los tratamientos. Se han obtenido resultados similares a los referidos en la literatura en cultivo primario de células epiteliales de córnea de conejo. En ningún caso se ha detectado reversibilidad del efecto tóxico.