Disferlinopatíasnuevos aspectos diagnósticos y terapéuticos

Resumen

La disferlina es una proteína que se expresa en el músculo esquelético humano. Aunque su función no se conoce completamente, se sabe que participa en la reparación de la membrana tras una lesión externa. Los pacientes con un déficit de disferlina sufren una distrofia muscular lentamente progresiva para la que no se conoce tratamiento alguno. En esta tesis hemos investigado nuevos aspectos diagnósticos y terapéuticos de esta enfermedad. Hemos demostrado que el estudio de la expresión de disferlina en monocitos de sangre periférica es una técnica útil para detectar pacientes con la enfermedad. Esta técnica es rápida, ya que se puede obtener un resultado en 48 horas, y evita la realización de biopsias musculares en pacientes con una disferlinopatía, aportando además material genético suficiente para poder detectar la presencia de mutaciones. Existen diferentes patrones de expresión de disferlina: los pacientes con dos mutaciones tienen niveles de entre un 0 y un 20%, los portadores de una única mutación tienen una expresión de entre el 20 y el 80% y en personas sin mutación en el gen de la disferlina los niveles se encuentran por encima del 80%. Hemos demostrado que existe una buena correlación entre la expresión de disferlina en monocitos y en músculo, siendo así una buena herramienta para confirmar la efectividad de tratamientos destinados a incrementar la expresión de disferlina. Desde el punto de vista terapéutico hemos investigado dos opciones diferentes. Por un lado hemos demostrado que la vitamina D es capaz de incrementar la expresión de disferlina tanto en monocitos como en miotubos de individuos portadores de una mutación en el gen de la disferlina in vitro. Estos resultados han sido confirmados in vivo gracias a la realización de un ensayo clínico con vitamina D en portadores de una mutación en el gen de la disferlina. Por otro lado hemos demostrado como el trasplante de un tipo de célula madre, los mesoangioblastos (MABs), es efectivo en un modelo murino de la enfermedad. Los MABs fueron aislados desde biopsias musculares de ratones sanos adultos e inyectados por vía intra-arterial en ratones A/J SCID deficitarios en disferlina. Estas células colonizaron los músculos enfermos, fusionaron con las fibras musculares enfermas y recuperaron la producción de disferlina. Este cambio, indujo una mejoría funcional notable, permitiendo que las fibras musculares fuesen capaces de reparar la membrana. Dado que los MABs son un subtipo de pericitos, células periendoteliales presentes en el músculo esquelético, estudiamos si los pericitos participan en el proceso de regeneración muscular in vivo en los músculos distróficos. Hemos observado que esta población celular está incrementada en biopsias distróficas, existiendo una buena correlación entre el número de células y el grado de destrucción y regeneración observado en las biopsias. Estas células expresan in vivo marcadores de diferenciación a músculo, como el factor MyoD, y son capaces de fusionar con miotubos in vitro, participando en el crecimiento de los mismos. Estos datos sugieren que los pericitos pueden participar en el proceso de regeneración muscular que tiene lugar en las distrofias musculares.