Diagnóstico molecular por reacción en cadena de la polimerasa del síndrome X frágil: aplicación de un protocolo diagnóstico en 50 familias del norte de España

  1. M. Durán Domínguez
  2. M. Molina Carrillo
  3. J. Fernández Toral
  4. T. Martínez Merino
  5. M.aA. López Arístegui
  6. A.I. Álvarez Retuerto
  7. M.aL. Onaindía Urquijo
  8. M.aI. Tejada Mínguez
Revista:
Anales de Pediatría: Publicación Oficial de la Asociación Española de Pediatría ( AEP )

Año de publicación: 2001

Volumen: 54

Número: 4

Páginas: 331-339

Tipo: Artículo

DOI: 10.1016/S1695-4033(01)77539-X DIALNET GOOGLE SCHOLAR lock_openAcceso abierto editor

Objetivos de desarrollo sostenible

Resumen

Objetivos Poner a punto una metodología rápida y eficaz para el diagnóstico molecular del síndrome X frágil (SXF), mediante técnicas de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) del triplete CGG, y establecer así un protocolo que nos sirva para: a) descartar el síndrome en pacientes con retraso mental no clasificado; b)averiguar el genotipo exacto de los individuos afectados; c)estudiar todos los individuos en riesgo de las familias con síndrome X frágil y encontrar los portadores asintomáticos, y d) proporcionar así el adecuado asesoramiento genético y reproductor a las familias en las que se transmita el síndrome. Pacientes y métodos Se estudiaron 438 muestras de individuos de 50 familias con síndrome X frágil. Se utilizaron tres protocolos de PCR, uno para detección con bromuro de etidio y luz ultravioleta; el segundo para detección con digoxigenina y el sustrato quimioluminiscente (CSPD), trasblotting e hibridación con la oligosonda (CGG)5; el tercero para amplificar y detectar de forma parecida el microsatélite DXS 548. Resultados Se encontraron 121 individuos con la mutación completa (60 varones y 61 mujeres); 86 premutados (7 varones y 79 mujeres); 16 mosaicos y 215 normales. La PCR ampli-ficó hasta 120-150 repeticiones, y fue necesario el estudio directo con sonda en el caso de ausencia de banda o banda única en mujeres. La PCR resultó más precisa que el Southern-blot de ADN genómico en los portadores premutados. Finalmente, se halló en una familia recombinación entre el locusFRAXA y el microsatélite DXS 548. Conclusiones Estos protocolos de PCR no radiactiva permiten el diag-nóstico rápido y seguro del síndrome X frágil, y están especialmente indicados en posibles portadoras y para establecer el diagnóstico prenatal.